鲤疱疹病毒病的防治方法

锦鲤疱疹病毒病,又名鲤鱼肾炎及鳃坏疽病毒,是一种令锦鲤养殖业者闻之色变的“瘟疫”,它的传染性和毒力极强,所有阶段的鱼体都可能感染KHV,且仅感染鲤鱼、锦鲤及其普通变种。

淡水鱼是水产养殖的主要鱼类之一,是主要食用鱼类之一,而且许多品种还是供观赏的,比如色彩艳丽的锦鲤。淡水鱼类在养殖中会受到各种致死性疾病的侵袭,致死性疾病包括病毒性疾病、细菌性疾病和寄生虫疾病。
一、病毒
是颗粒很小、以纳米为测量单位、结构简单、寄生性严格,以复制进行繁殖的一类非细胞型微生物。病毒是比细菌还小、没有细胞结构、只能在细胞中增殖的微生物。由蛋白质和核酸组成。多数要用电子显微镜才能观察到。病毒的病理学两重性
一方面:病毒的致病性和非致病性问题,是同宿主细胞相对而言的,在分子水平、细胞水平和机体水平,可能有不同的含义。在细胞水平有细胞病变作用,但在机体水平可能并不显示临床症状,此可称为亚临床感染或不显感染。
另一方面:病毒感染的急性和慢性病毒感染所致的临床症状有急、慢之分,有的病毒一般只表现急性感染而很少表现慢性感染;有的则既有急性过程,也有慢性过程。
所以,病毒病原微小,感染动物后便在宿主细胞内复制,抗菌素对病毒几乎不起作用,而化学药物在灭活病毒前就可能对宿主细胞产生损害。尤其在每年的春秋季节,是鱼类病毒性疾病的多发季节,因为水温是最适合病原生长繁殖的。同时,病毒性疾病具有潜伏期长短不一,发病症状复杂多变,传染性强,死亡率高的特点。
二、锦鲤疱疹病毒 1、鲤疱疹病危害 新华社2010-07-15
日本多家养鱼场因鲤鱼疱疹病毒而报废新华社信息东京1月17日电因日本茨城县霞浦和北浦鲤鱼养殖场无法根除鲤鱼疱疹病毒,58家鲤鱼养殖业主近日向茨城县知事提出申请,决定放弃渔业养殖。
据《读卖新闻》16日报道,从2003年11月开始,霞浦和北浦两湖养殖的鲤鱼大量死亡,化验结果表明是受鲤鱼疱疹病毒感染。有关部门12月作出决定,销毁两湖养殖的所有鲤鱼。由于没能查明感染途径,若干年内无法开业,鲤鱼养殖业主经过讨论于近日作出决定,放弃渔业养殖,并向茨城县有关当局提出补偿要求,具体补偿额还有待商议。霞浦和北浦两湖养殖的鲤鱼占日本市场鲤鱼份额的50%,业主放弃养殖鲤鱼之后,市场鲤鱼供不应求的局面将持续下去。
据悉,个别鲤鱼养殖业者为再次开业曾向银行申请贷款,但遭到拒绝,在四面楚歌的情况下不得不放弃渔业养殖。
2、鲤鱼疱疹病的发展 1998 年, 在以色列首先暴发锦鲤疱疹病毒病,
使以色列锦鲤和鲤鱼养殖业遭受到毁灭性的打击。紧接着, 美国和欧洲一些国家,
如英国、德国、比利时、荷兰,亚洲一些国家,
如印度尼西亚、日本和南韩养殖的锦鲤也因锦鲤疱疹病毒病而大量死亡,累计死亡率达到90
%.。2002 年4 月中旬在印度尼西亚养殖的锦鲤和鲤鱼中暴发此病, 损失达500
万美元。2003 年10 月日本10 余个县暴发该病,到11
月份已经造成近千吨的鲤鱼和锦鲤死亡。2004年4 月,
我国的台湾省报道流行锦鲤疱疹病毒( KHV)病, KHV 病毒从2002 年12
月就已入侵台湾, 由于未能引起足够重视, 造成了锦鲤的大量死亡,
死亡率高达80%~100%。2004-02-03 农业部渔业局
农渔养殖函[2003]108号各省、自治区、直辖市及计划单列市、新疆生产建设兵团渔业主管厅:关于加强鲤疱疹病毒应急监测工作的通知
症状:病鱼临床症状为停止游动,皮肤上出现苍白的块状斑与水泡,鳃出血并产生大量黏液或组织坏死,鳞片有血丝,鱼眼凹陷,患病鱼1-2天内死亡,目前主要采用聚合酶链反应技术诊断。
措施:为避免疫情的传入和蔓延,保障我国水产养殖业持续健康发展,现将有关事项通知如下:一、要紧急启动鲤疱疹病毒的监测工作,重点加强进口养殖鲤鱼与锦鲤的监测,发现疑似病例要及时送国家水生动物病重点实验室检测,并向我局报告。
二、对有疑似病例的养殖场要按照《动物防疫法》及有关水生动物防疫的规定实施隔离监管,并做好防疫消毒工作,对确诊病例要进行无害化处理。三、渔业主管部门要及时将情况通报畜牧兽医部门、出入境检验检疫机构,加强配合,采取有效措施,共同做好工作。
中华人民共和国农业部公告的水生动物疫病名录及特征 二○○八年十二月十一日
二类动物疫病
鱼类病:草鱼出血病、传染性脾肾坏死病、锦鲤疱疹病毒病、刺激隐核虫病、淡水鱼细菌性败血症、病毒性神经坏死病、流行性造血器官坏死病、斑点叉尾鮰病毒病、传染性造血器官坏死病、病毒性出血性败血症、流行性溃疡综合症
二类疫病,是指可能造成重大经济损失,需要采取严格控制、扑灭等措施,防止扩散的。《动物防疫法》第三十二条规定:发生二类动物疫病时,应当采取下列控制和扑灭措施:
当地县级以上地方人民政府兽医主管部门应当划定疫点、疫区、受威胁区。
县级以上地方人民政府根据需要组织有关部门和单位采取隔离、扑杀、销毁、消毒、无害化处理、紧急免疫接种、限制易感染的动物和动物产品及有关物品出入等控制、扑灭措施。
三、流行情况 1、概念 锦鲤疱疹病毒( koi herpesvirus ,
KHV)仅限于锦鲤和普通鲤鱼, 而金鱼、草鱼、罗非鱼等对 KHV 有抵抗力.
该病呈季节性爆发(春秋两季) ,发病时水温为18~28 ℃,22~24
℃病毒感染力最强。 KHV 某些物理、生化性质与鲤鱼疱疹病毒(CHV)
相似,但在细胞系特异性、CPE类型、抗原特异性等方面有所不同.
两者最大的区别是 KHV 可感染各年龄段普通鲤鱼和锦鲤,而 CHV 主要感染小于 2
月龄的鱼,大于 2 月龄鱼对 CHV 有抵抗力。 KHV
是近年来在锦鲤和普通鲤鱼中发现的一种新病毒,它传染性强,死亡率高达80%~100%,死亡较快,,呈世界性分布和流行,
一旦暴发流行,就给锦鲤观赏渔业和鲤鱼养殖业造成了很大的经济损失 2、
临床症状 1)养殖鲤鱼
临床表现为行动迟缓,病鱼在水面停滞或漫游,有的体色严重发黑、在池塘边缘少量聚堆、停滞,渔民称“散边”。
体表花斑状,特别是无鳞的框鲤,在水中明显。有鳞的鲤鱼不明显。
体表多黏液,但大多数无皮肤溃疡或出血。
缩头:渔民也叫“骷髅头”、“扣扣眼”。有的鱼不明显。实际是眼内陷。
烂鳃:鳃丝呈条状坏死样烂鳃,不烂处的鳃丝外观正常,并挂泥。与细菌性慢性烂鳃呈大面积浅表溃烂不同。养殖户称“花鳃”或“黑鳃”。脾肿大、肾肿大。
鱼肠道内壁呈均匀的大面积出血,肠内无黄色脓状物,为单一症状,无没有其他症状。
2)锦鲤 病程不同时期, 锦鲤其表现出的临床症状有差异性。 发病初期
体表有少量出血, 少量鳞片脱落, 鳞片松动, 鳞片上出现血丝; 眼凹陷;
肛门轻微红肿; 鳍条尤其尾鳍充血严重, 估计是尾鳍日常运动多的原因;
撕开皮肤, 出现皮下充血和肌肉出血症状, 出血和充血沿着肌刺分布较多;
打开鳃盖, 鳃丝颜色深红色, 剪去一条全鳃,
流出的血液明显偏少并且凝集非常迅速, 约流出4 s 开始快速凝固,
血液凝固时间明显比健康鱼短; 打开腹腔剪开心脏, 出血明显比健康的鲤鱼少,
并且凝血迅速;肠道无其他炎症但充血发红, 尚未出血; 肝小叶末端有细小出血点,
表面活性物质部分丧失, 易碎; 脾脏有出血点, 镜检发现内部有少量出血点,
出血点呈鲜红色;后肾肿大, 镜检有出血点, 鲜红色; 胆固缩, 颜色变深。
发病中后期 患病锦鲤出现精神沉郁, 食欲废绝; 行为上会出现无方向感的游泳,
或在水中呈头下尾上的姿势漂游, 甚至停止游泳; 皮肤上出现苍白的块斑和水泡;
鳍条充血, 尤其是尾鳍; 鳞片上出现血丝, 病鱼口腔充血和出血, 腹部出血,
病鱼鳃出血并产生大量粘液或组织坏死; 患病鱼在1 d~2 d 内就会死亡。 KHV
发生时, 表现出发病急、感染率高、死亡率高等特点,
并且最先死亡的往往是个体肥满度比较高的,最后带毒存活的往往是比较畸形、瘦小的个体。
试验室诊断 临床表现与许多普通的细菌感染和寄生虫侵袭相似,
因此不能单纯通过观察鱼的外部特征或临床表现来进行决定性的判断。该病毒的最后确认需要试验室的诊断结果,
临床症状仅供初步判断。目前有效的检测和诊断手段不多,
主要是聚合酶链式反应( PCR) 方法。国外对KHV 检测方法尚未标准化,
但通常是采用细胞培养技术分离病毒, 然后用PCR 进行鉴定。 3、致病途径
锦鲤疱疹病毒的致病机制还在研究的初级阶段,有研究人员提出过这样一种假设:遭受锦鲤疱疹病毒粒子感染的鲤鱼或锦鲤,它们污染过的水里可能存在的病毒粒子可以通过鳃进入鱼体内,病毒粒子在鱼体内进行大量复制,同时导致表皮黏膜腐败和坏死。然后病毒粒子快速的从鳃传播到肾,诱导间质性肾炎,最终诱导健康鱼发病;另一种说法是病毒通过表皮脱落或腐败的方式释放到水中,在经过鳃侵入鱼体内进行复制,再把病毒粒子释放到水中,以此重复循环感染鱼体。Costes
等学者也证实了病毒粒子主要是通过皮肤感染进入鱼体内的。 4、传染性强
传染方式:鱼种、网具、水源等。
从各个池塘发病时间上看,有明显的相邻池塘接连发病、逐渐向远方传染的现象。
5、 发病时间 据报到该病毒的试验室最适培养温度是21℃, 发病水温18℃~29℃,
发病高峰水温为22℃~28℃, 该病在春季和秋季多发生。本地区大致发生时间: 5
月中下旬、8 月上旬~9 月上旬;。鱼类已经感染KHV 的情况下,
养殖水温在18℃~27℃之间持续的时间越长, 就越有可能暴发。 6、药物治疗
用抗菌药物外泼和内服无效。 使用消毒剂、杀虫剂、食盐等后,加重死亡。
采用减料、增氧、稳水、抗应激、增强免疫力的方法效果好。早期采用此方法,能够缩短病程、减少死亡。如果使用刺激性强的药物,死亡量增加,先解毒,再采用此方法,同样能够大幅度降低死亡。后期应该结合外泼抗菌药物,控制烂鳃引起的死亡效果明显。该病后期也对药物刺激反应强烈,可以建议后期少量多次外泼聚维酮碘等刺激小的药物。
7、免疫性
池塘春天得过疱疹病毒病后,不重复感染,一般秋天不再得该病。秋天得了,一般次年春天不得。
四、疾病预防措施
“防大于治”,它对于淡水鱼病毒性疾病也同样适用,所以淡水鱼病毒性疾病的预防显得尤为重要,要怎么预防成了关键因素。对于病毒病目前还没有特效预防药。而专家们也一致反对滥用药物,认为那样不仅会降低鱼等水生动物的肉质质量,并留下残留的毒性,还会降低动物自身的抗病能力,污染水体环境。
1、疫苗
制备高效价的疫苗是预防淡水鱼病毒性疾病的有效措施。从疫苗的研究情况看,灭活疫苗、减毒疫苗、细胞工程疫苗等对草鱼出血病的防治已做出重要贡献,对于其他水生动物,疫苗的制备与使用还处于不成熟阶段,锦鲤疱疹病毒到目前为止,只有组织灭活疫苗的研究,效果还不是十分理想,该病的较有效的疫苗是通过变温的方法或在敏感细胞上连续传代获得非致病的突变株,作为弱毒疫苗免疫锦鲤和鲤鱼,免疫保护率可达80%以上。但是弱毒疫苗存在易返祖和不易保存等缺点,还需要研究更加安全有效的基因工程疫苗。
2 、预防措施 从病毒病的致病机理看, 由于病毒是专一性寄生于细胞内的生物,
当病毒感染鱼体后, 在细胞内进行复制, 消耗细胞内的物质和能量,
最终结果往往是破坏细胞结构, 使细胞崩解而死亡,
这就是病毒病发生的根本原因。在体外有许多方法杀死病毒,
而在体内则十分困难。所以对付病毒病的最好方法是要以预防为主,不让鱼与病毒接触。措施如下:

KHV的死亡率与养殖密度有关,网箱养殖死亡率为50%-80%,最高可达100%。病毒主要受水温影响,易发水温为18℃~28℃,23℃~28℃容易引起暴发流行。KHV的麻烦之处就在于,锦鲤可在较低水温下感染但不表现出病症,当水温升高时,则会出现典型的疾病特征和死亡现象,一般出现在春秋季,所以,秋季特别是我国南方地区,应重点注意防范此病。

  1. 1 开展流行病学调查,
    建立疫情报告制度利用我省现有的水生动物病害测报系统和各级鱼病防治网络开展流行病学调查工作,
    并依据《水生动物防疫管理办法》,建立疫情逐级报告制度。对有疑似病例的养殖场要按照《动物防疫法》及有关水生动物防疫的规定实施隔离监管并做好防疫消毒工作,
    对确诊病例要进行无害化处理。 2. 2 建立隔离制度养殖动物疫病一旦发生,
    特别是传染性疾病, 首先必须采取严格的隔离措施,
    以免疫情传播蔓延。实施隔离, 即对已发病的池塘或地区首先进行封锁,
    对池内的养殖动物不向其它池塘和地区转移,
    不排放池水。工具未经消毒不在其它池使用。与此同时,
    饲养人员要勤于清除发病死亡尸体, 及时掩埋、销毁。对发病鱼类及时做出诊断,
    确立对策指导疾病防治和控制疫情流行。 2. 3
    不从疫区引进苗种在水产苗种引进、运输、饲养过程中,
    要教育渔民增强风险意识, 特别要增强病毒病的防范意识, 不从疫区引进苗种。
  2. 4 加强饲养管理进行综合防治要采取以防为主的措施。采用:
    控制和消灭病原体, 切断传播途径; 改善和优化养殖环境;
    提高养殖种群和养殖群体的免疫力等全面综合预防措施, 防止病毒病的发生。 3、
    管理措施
    3.1在鱼苗入池后,尽快调节池水温度。锦鲤疱疹病毒在23~28℃是最易发病的温度,水温保持在18℃左右可以减少发病几率,也不会对鱼的生长造成影响;
    3.2轮养
    在流行过此病的地区改养对该病不敏感的鱼类,而且放养前要对水池彻底清理,入池前的鱼苗要经过严格的筛选和消毒;
    3.3饵料中要富含鱼苗生长所需的各种营养成分,以提高鱼体的免疫力;
    3.4合理的换水增氧,尤其在阴雨天或是冬季,保持鱼塘内有充足、新鲜的氧气;
    3.5养殖密度不宜太大;
    3.6加强日常管理,做到每天都观察鱼体活动情况,并做好记录;
    3.7使用的工具及运输车辆要定期消毒;鲤鱼疱疹病毒病的防治方法
    鲤鱼疱疹病毒病是20世纪末被确诊的一种疾病,现已流行于世界各地。最近几年在我国主要鲤鱼养殖区域都有流行,并呈逐年暴发流行的趋势,网箱、池塘等各种养殖模式都呈现处病程短,死亡率高的特点,成为养殖户的心腹大患。由于对该病的认识不够,绝大多数从业者对此病了解不够,很多按细菌性烂鳃等病处理,结果造成越治越死,经济损失极具增加的情况。
    一、病原
    病原是锦鲤疱疹病毒,暂列为疱疹病毒科,鲤疱疹病毒属。又称鲤疱疹病毒Ⅲ型,与鲤痘疮病毒,和金鱼造血器官坏死病毒同属。
    二、流行情况
    疱疹病毒病在辽宁地区每年有2个主要发病阶段,一是春夏交接期。雨水多、长期低温的时候发病比较重。水温渐渐升高到30℃的时候,鱼病可逐渐缓解至痊愈。二是夏秋转换期,水温逐步下降时。发病水温在18-28℃,以23-28℃最为严重。
    该病传染性很强,鱼种、渔具及水源都会造成传染。往往一个地区发病,整个区域难于幸免,呈现出快速蔓延的趋势和流行特点。
    三、症状
    病鱼体质瘦弱,体表粘液增多,眼睛及头部上方凹陷,俗称“骷髅头”,有的鱼不明显。鳃丝局部腐烂。解剖内脏,肝脏有失血或出血现象,大部分肝脏有不同程度的脂肪肝症状。胆和肾脏肿大,部分胆囊有充血现象,肠道发炎红肿。发病前有“暴食”现象,后期体表有花斑出现,框镜更明显。
    四、诊断
    根据症状及流行情况进行初步诊断,但要区分开和细菌性烂鳃的区别,细菌性烂鳃不会眼球突出或凹陷,从表层开始腐烂,呈现大面积浅表腐烂。疱疹病毒从里层鳃片向外层腐烂,且不烂处鳃丝正常。

▲感染疱疹病毒病的锦鲤幼鱼外观

KHV症状

1、水面出现水泡就如产卵期的雄鲤大量释出精子

2、发病鱼离群、嗜睡,聚集在入水口或池塘边,浮在水面大口呼吸。一些鱼可能身体失衡,无方向感。有些鱼可能躁动不安,然后是不活跃期。

3、皮肤苍白或发红,或质地粗糙(砂纸样),局部或全部上皮脱落,皮肤或鳃粘液分泌过度或不足,鳃苍白。皮肤和鳍根部出血,以及鳍条糜烂。

▲疱疹病毒病鱼的鳃部

▲病鱼口腔充血及出血

▲病鱼腹部出血,鳍条充血

▲病鱼尾鳍出血

▲患病锦鲤鳞片上出现血丝

4、鱼眼凹陷,类似寄生虫感染和细菌感染;有时会沉在池底的一角,有时会在池壁附近浮沉,鼻子往上仰,浮在水面的鱼一直在水面2~3天,感觉像死了一样。

▲病鱼眼部凹陷,头部黏液分泌过多

5、鱼死亡后会在池底或水面,和我们一般认识死鱼浮出水面的情形不同,死亡的鲤鱼横躺在池底,经过一天后才能浮上来。

6、茶鲤和无花纹鲤会出现鱼体变黑。

出现症状后24-48h后开始死亡,至2-4天内死亡率可迅速达80%-100%。

感染KHⅤ后病鱼最明显的损伤是鳃、肾脏、肝脏和脾脏。

鳃丝变为深红色,鳃片减少,鳃结构消失,鳃弓内血管充血。

▲病鱼鰓出血,局部轻微糜烂

病变以肾脏为重,肾脏充血、出血;肾小管周围出现炎性浸润、间质性炎症。管状上皮细胞轻微变性。

▲肾脏肿大、溃烂、肠道充血

肝胰脏肿大,呈灰白色;肝实质炎性浸润或出血。脾脏变紫红色,出血;肠道充血,肠系膜出血;局灶性脑膜和脑膜旁炎症。

KHV传播方式

KHV主要是病毒通过鱼的粪便、尿液、鳃和皮肤粘液排出体外。此病的水平传播速度极快,通过接触病鱼,或者是被污染了的水体、底泥等都可能感染。尤其是水质恶化、鲤鱼吃食不好的池塘更容易患此病。鳃坏死是该病的主要症状之一。

▲病鱼鰓组织糜烂严重

在发病早期的鳃组织中就可检测到病毒DNA。另有研究表明,鲤鱼的皮肤是KHⅤ的主要侵入途径。KHV侵入鱼体后,会在肾脏中大量增殖。

KHV预防及控制

KHV病毒在22℃池塘水中可存活4h,在粪便和池塘淤泥中可能存活较长时间。病毒在60℃30min或35℃
2天、pH低于3或高于11的条件下失活。并且易被氯仿、25%乙醚或0.1%的
Tritonⅹ-100灭活。病毒经紫外线照射和50℃以上1min灭活。在15℃时,下列消毒剂作用可灭活病毒:200mg/L碘伏20min,60mg/L苯扎氯铵20min,30%乙醇20min,次氯酸钠200mg/L30s。

到目前为止,对该病尚无切实有效的治疗方法。一般采用综合防制措施防控KHV。平时注意加强饲养管理,改善和优化养殖环境;提高养殖种群和养殖群体的免疫力。加强产地检疫,不从疫区引进苗种。要求外来鱼同本地鱼隔离养殖,水体、器具也不应混用。

▲感染KHV的锦鲤

KHV的治疗

对于KHV的治疗,一直都是大家最关心的。疱疹净、阿糖腺苷、无环鸟苷等化学抗病毒药物在人体临床治疗疱疹病毒应用广泛,但不适合于水产养殖。这里给大家分享几种在实验中表现较好的天然中药——黄芪多糖、银黄、炎琥宁以及板蓝根,这四种均有阻止KHV病毒吸附和穿入锦鲤正常细胞的作用。但只有板蓝根在浓度为31.25mg/mL体外对KHV有较弱的直接杀灭作用,其他三种只能预防和抑制。

黄芪多糖在先给药后感染实验中,病毒抑制率达到80%以上,而在先感染后给药实验中,抑制率低于80%,黄芪多糖在KHV病毒的攻击下对锦鲤细胞会起保护作用,但不能抑制KHV的增殖,也不能杀死KHV病毒。适合前期预防。

银黄在抗病毒作用中发挥着阻断KHV病毒吸附锦鲤正常细胞和抑制病毒增殖的作用。

炎琥宁注射液是植物穿心莲经一系列化学操作得出的,临床上常用于人的病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染。炎琥宁在先给药后感染和先感染后给药中,病毒抑制率可达80%左右,显示炎琥宁有阻断KHV吸附锦鲤正常细胞作用,并有一定的保护细胞、抑制KHV病毒感染的作用。

板蓝根除了能阻断和抑制KHV病毒增殖,同时也具有较弱杀死KHV作用。根据实验数据,板蓝根浓度在31.25mg/ml时,对鲤疱疹病毒的抑制率在80%以上,兼带有较弱的杀灭作用。用量需要根据实际水体大小换算。